高效抗猪瘟病毒shRNA的筛选

作     者：戴祯 王铁东 王侃侃 欧阳红生 涂长春 逄大欣 

作者机构：吉林大学动物科学学院吉林长春130062 军事医学科学院军事兽医研究所吉林长春130062 

基　　金：国家转基因生物新品种培育重大专项资助项目(2011ZX08006-001) 

出 版 物：《中国兽医学报》 (Chinese Journal of Veterinary Science)

年 卷 期：2014年第34卷第2期

页      码：182-186,191页

摘      要：为降低RNAi技术的毒副作用,筛选高效抑制猪瘟病毒复制的shRNA序列,根据有关报道构建了荧光报告系统shRNA筛选平台。该平台以9种抑制效率分别为强、中、弱的shRNA筛选载体作为参照,结合荧光报告系统进一步量化shRNA的抑制效率。根据2种已知体外有效抑制猪瘟病毒复制的siRNA-N2、siRNA-NS5B,分别设计得到shRNA-N2、shRNA-NS5B表达载体,继而采用高效、高灵敏度的shRNA筛选平台对这2种shRNA进行了检测,结果显示单拷贝情况下,shRNA-N2抑制靶序列效率较强,shRNA-NS5B抑制效率弱。本试验通过新策略大大提高了shRNA干扰效率检测的灵敏度,为采用shRNA转基因克隆动物进行抗病育种的研究提供了保障。

主 题 词：猪瘟病毒 shRNA筛选 单拷贝 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录：

D　O　I：10.16303/j.cnki.1005-4545.2014.02.002

馆 藏 号：203643039...