两种不同肝纤维化相关细胞因子shRNA重组质粒的构建

作     者：蒋玉凤 刘加群 张建军 孙华丽 黄飞 Jiang Yufeng;Liu Jiaqun;Zhang Jianjun;Sun Huali;Huang Fei

作者机构：泸州医学院附属医院感染病科四川泸州646000 河北省秦皇岛市第三人民医院肝病科066000 山东省菏泽市市立医院传染科274031 湖北省荆州市中心医院感染科434000 

基　　金：四川省卫生厅科技项目(080197) 四川省重点学科资助项目(SZD0421) 

出 版 物：《重庆医学》 (Chongqing medicine)

年 卷 期：2011年第40卷第23期

页      码：2341-2342,2345,I0002页

摘      要：目的构建以大鼠结缔组织生长因子(CTGF)和金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1)基因为靶点的短发夹RNA(shRNA)表达质粒。方法根据前期筛选出的对CTGF和TIMP-1基因最有效的RNA干扰靶位,各设计一对有短发夹结构的RNA干扰(RNAi)靶点序列,退火形成双链DNA,克隆到质粒载体psiRNA-h7SKGFPzeo;构建重组质粒载体psiRNA-GFP-CTGF和psiRNA-GFP-TIMP-1,并进行酶切与测序鉴定。结果酶切与序列测定均提示重组质粒psiRNA-GFP-CTGF和psiRNA-GFP-TIMP-1构建成功。结论成功构建靶向大鼠CTGF和TIMP-1最有效的RNAi靶位的shRNA表达质粒,为进一步探索肝纤维化基因治疗的新途径打下了实验基础。

主 题 词：金属蛋白酶类 RNA干扰 质粒 肝纤维化 生长因子 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100201[100201] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1671-8348.2011.23.020

馆 藏 号：203648050...