小麦淀粉分支酶基因SBE-Ⅱb植物表达载体的构建及表达鉴定

作     者：王自布 齐军仓 李卫华 曹连莆 石培春 WANG Zi-bu;QI Jun-cang;LI Wei-hua;CAO Lian-pu;SHI Pei-chun

作者机构：贵州省生物资源开发利用特色重点实验室贵州贵阳550018 石河子大学农学院新疆石河子832003 

基　　金：教育部生物资源科学专业综合改革试点项目(2012287) 贵州省重点支持学科建设项目(2011231) 贵州师范学院博士启动基金项目(12BS028) 

出 版 物：《江西农业大学学报》 (Acta Agriculturae Universitatis Jiangxiensis)

年 卷 期：2013年第35卷第3期

页      码：620-625页

摘      要：从花后15 d的小麦(Triticum aestivum L.)胚乳中提取RNA,根据GeneBank上已经公布的小麦淀粉分支酶基因(SBE-Ⅱb)序列(AY740401.1)设计引物,经RT-PCR扩增得到一条2 511 bp的条带,测序结果与公布的序列一致。将克隆得到的基因构建到了植物表达载体pPZP35S上,通过农杆菌叶盘转化法转化烟草叶片,经卡那霉素筛选、PCR扩增鉴定证明,SBE-Ⅱb基因已成功转入烟草细胞中,获得4个转基因株系。转基因烟草叶片与野生型比较,颜色变暗,植株较小。RT-PCR半定量和实时荧光定量RT-PCR分析表明,转基因烟草株系的叶片中有SBE-Ⅱb基因的表达,与对照植株相比,转SBE-Ⅱb基因的植株中的转录本达到了显著性的变化,但是其淀粉分支酶活性没有达到显著性变化。

主 题 词：小麦 转基因 实时荧光定量(qRT-PCR) 淀粉分支酶基因(SBE-Ⅱb) 

学科分类：09[农学] 0901[农学-植物生产类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1000-2286.2013.03.033

馆 藏 号：203648993...