禽呼肠孤病毒σNS和σC基因shRNA载体构建及其干扰效果测定

作     者：熊文婕 谢芝勋 刘加波 庞耀姗 谢志勤 邓显文 谢丽基 XIONG Wen-jie;XIE Zhi-xun;LIU Jia-bo;PANG Yao-shan;XIE Zhi-qin;DENG Xian-wen;XIE Li-ji

作者机构：防城港市动物疫病预防控制中心广西防城港538001 广西壮族自治区兽医研究所广西南宁530001 

基　　金：国家百千万人才工程入选专项资金项目(945200603) 广西特聘专家专项经费(2011B020) 广西自然科学基金项目(桂科自0991222) 广西留学回国人员基金项目(桂科回0639016) 

出 版 物：《西南农业学报》 (Southwest China Journal of Agricultural Sciences)

年 卷 期：2012年第25卷第2期

页      码：697-702页

摘      要：禽呼肠孤病毒σC基因是病毒粘附蛋白,σNS基因具有结合单链RNA活性。根据siRNA靶序列设计原则,设计并合成siRNA模板并克隆到shRNA表达载体pSilencer-CMV 4.1 neo。分别构建了针对σC基因的shRNA载体C1、C2、C3和针对σNS基因的shRNA载体NS1、NS2、NS3。将构建的shRNA载体和阴性对照分别与表达σC和σNS基因的融合蛋白的真核表达载体pEGFP-σC及pEGFP-σNS共转染DF-1细胞。荧光显微镜观察结果表明,6个shRNA片段不同程度地抑制各自融合蛋白的表达。Real-time PCR检测结果表明,C3和NS1体外干扰病毒复制的效果最佳。

主 题 词：禽呼肠孤病毒 shRNA 干扰 

学科分类：090602[090602] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1001-4829.2012.02.070

馆 藏 号：203650241...