构建干扰RhoA的短发夹RNA真核表达载体

作     者：卢永清 苏继荣 董红霖 李文龙 武伟 张治军 杨涛 李久池 LU Yong-qing;SU Ji-rong;DONG Hong-lin;LI Wen-long;WU Wei;ZHANG Zhi-jun;YANG Tao;LI Jiu-chi

作者机构：山西医科大学第二医院普外科太原030001 

基　　金：山西医科大学第二医院博士基金资助项目(200501) 

出 版 物：《中国药物与临床》 (Chinese Remedies & Clinics)

年 卷 期：2007年第7卷第5期

页      码：342-345页

摘      要：目的利用pGenesil-1质粒构建针对RhoA的短发夹RNA(shRNA)表达载体。方法设计2个shRNA结构的互补DNA序列,经退火成双链,胶回收酶切pGenesil-1大片段,T4DNALigase连接酶切大片段和DNA序列,得到质粒pGenesil-1-RhoA1和pGenesil-1-RhoA2.转化感受态细胞DH5a,扩增,提取重组质粒进行酶切鉴定。结果成功构建靶向RhoA的shRNA重组质粒载体.酶切鉴定和测序分析重组质粒,shRNA编码序列与设计的片段完全一致,经酶切凝胶电泳证实载体构建成功。结论表达靶向RhoA的shRNA表达框成功构建在重组质粒载体上。

主 题 词：RhoA RNA干扰 shRNA 质粒 

学科分类：1001[医学-基础医学] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1671-2560.2007.05.006

馆 藏 号：203655603...