利用N-糖基化修饰对β-甘露聚糖酶Man47的稳定性改造

作     者：谢春芳 黎玉凤 刘大岭 姚冬生 

作者机构：暨南大学生物工程学系广州510632 广东省生物工程药物重点实验室广州510632 暨南大学生物医药研究院广州510632 基因工程药物国家工程研究中心广州510632 

基　　金：国家"863"计划资助项目(2013AA102801) 

出 版 物：《中国生物工程杂志》 (China Biotechnology)

年 卷 期：2013年第33卷第12期

页      码：79-85页

摘      要：N-糖基化是真核生物蛋白质最重要的翻译后修饰之一。以Armillariella tabescensβ-甘露聚糖酶Man47为研究对象,利用计算化学对***β-甘露聚糖酶Man47进行理性设计,经过分子对接、二级结构分析和糖基化的可行性分析后,构建具有EAS(enhanced aromatic sequence)序列的突变体g-123作为N-糖基化的突变位点。将其整合到毕赤酵母表达载体SMD1168上,通过电转化得到重组转化子。最后对突变体g-123的温度稳定性、酸碱稳定性、胃蛋白酶和胰蛋白酶抗性进行分析。结果表明:糖基化***β-甘露聚糖酶Man47突变体g-123与野生型相比,其热稳定性、酸碱稳定性、蛋白酶抗性均得到不同程度的改善。

主 题 词：N-糖基化 翻译后修饰 蛋白质设计 生物信息学 

学科分类：08[工学] 09[农学] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录：

D　O　I：10.13523/j.cb.20131212

馆 藏 号：203658438...