细胞水平狂犬病病毒感染的RNA干扰

作     者：张守峰 李清竹 李忠 刘晔 张菲 卢彦欣 夏咸柱 扈荣良 ZHANG Shou-feng;LI Qing-zhu;LI Zhong;LIU Ye;ZHANG Fei;LU Yan-xin;XIA Xian-zhu;HU Rong-liang

作者机构：吉林大学畜牧兽医学院吉林长春130062 沈阳农业大学畜牧兽医学院辽宁沈阳110161 军事医学科学院军事兽医研究所吉林长春130062 

基　　金：国家自然科学基金项目(30300255) 军队医学杰出中青年基金项目(04J016) 

出 版 物：《病毒学报》 (Chinese Journal of Virology)

年 卷 期：2006年第22卷第6期

页      码：462-465页

摘      要：以质粒pSilencer2.1-U6 Hygro为基础,设计并构建了针对狂犬病病毒(RV)糖蛋白和核蛋白mRNA的共9个siRNA表达载体,转染BHK-21细胞系后,在潮霉素-B的筛选压力下,获得9个稳定转录相关siRNA的BHK-21细胞株。1000TCID50的RV分别感染24孔板内的上述9株细胞,48h后以直接免疫荧光法检测各株细胞上RV的增殖,结果显示,在经不同siRNA表达载体转染的BHK-21细胞中,RV增殖水平有不同程度下降,RV增殖水平最低者为对照细胞的1%,即RNA干扰效应最高可阻断99%RV的感染。针对其中阻断水平超过90%的靶序列G69和N19,人工合成其双链siRNA,瞬时转染BHK-21细胞后,仍可达到80%以上的感染阻断率。本试验为有效阻断RV早期感染提供了新选择,为通过RNAi研究RV的基因组功能提供了新的依据。

主 题 词：狂犬病病毒 RNAi 感染 糖蛋白 核蛋白 

学科分类：1004[医学-公共卫生预防医学类] 100401[100401] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3321/j.issn:1000-8721.2006.06.010

馆 藏 号：203663349...