H3N2亚型禽流感病毒三重RT-PCR检测方法的建立

作     者：刘婷婷 谢芝勋 宋德贵 罗思思 谢丽基 李孟 谢志勤 邓显文 LIU Ting-ting;XIE Zhi-xun;SONG De-gui;LUO Si-si;XIE Li-ji;LI Meng;XIE Zhi-qing;DENG Xian-weng

作者机构：广西师范大学生命科学学院广西桂林541000 广西兽医研究所畜禽疫苗新技术重点实验室广西南宁530001 

基　　金：广西特聘专家专项(2011B020) 广西科技攻关重大专项项目(1222003-2-4) 广西畜禽疫苗新技术重点实验室项目(13-051-27-A-2) 

出 版 物：《动物医学进展》 (Progress In Veterinary Medicine)

年 卷 期：2015年第36卷第2期

页      码：7-11页

摘      要：为建立检测禽流感病毒(AIV)且同时区分H3N2亚型AIV的方法,本研究根据H3、N2亚型AIV HA、NA基因及AIV最保守M基因的保守区域,设计并筛选出3对特异性引物,通过优化反应条件,建立了AIV H3N2亚型和M基因三重RT-PCR的检测方法。对该法进行特异性及敏感性检测,并通过该三重RT-PCR方法对96份临床样品进行检测。结果显示,H3N2亚型AIV可扩增出3条特异性条带,其中518bp为AIV M基因、418bp为N2亚型AIV NA基因、271bp为H3亚型AIV HA基因;H3亚型和N2亚型AIV均可扩增出2条特异性条带,大小分别为518bp、271bp和518bp、418bp;其他亚型AIV可扩增出一条特异性条带,大小为518bp;常见禽病病原体均未扩增出任何条带。敏感性试验表明该法对H3N2亚型AIV的检测下限为100pg,96份临床样品检测结果与病毒分离鉴定结果一致。本研究所建立的AIV H3N2亚型和M基因三重RT-PCR为一种简便、快速、有效的检测方法。

主 题 词：禽流感病毒 H3N2亚型 M基因 三重RT-PCR 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 090601[090601] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 0906[农学-水产类] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.16437/j.cnki.1007-5038.2015.02.004

馆 藏 号：203663656...