三七总皂甙通过细胞外信号调节蛋白激酶1/2信号通路促进大鼠骨髓基质细胞向神经样细胞的增殖与分化

作     者：张震宇 曾艳 李学东 刘东宁 Zhang Zhen-yu;Zeng Yan;Li Xue-dong;Liu Dong-ning

作者机构：汕头市中心医院神经外科广东省汕头市515031 汕头大学医学院第一附属医院骨外科广东省汕头市515041 

基　　金：广东省中医药科研基金资助项目(2008163) 广西梧州制药(集团)股份有限公司科研基金项目 

出 版 物：《中国组织工程研究与临床康复》 (Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research)

年 卷 期：2009年第13卷第23期

页      码：4529-4533页

摘      要：背景：三七总皂甙对骨髓基质细胞向神经样细胞分化的效应及相关信号通路目前尚不明确。目的：探讨细胞外信号调节蛋白激酶1，2信号通路对三七总皂甙调节大鼠骨髓基质细胞向神经细胞增殖、分化的作用。设计、时间及地点：细胞学体外观察，于2008-05／10在汕头大学医学院分子生物学实验室完成。材料：4-6周龄雄性SD大鼠9只，由汕头大学医学院实验动物中心提供。三七总皂甙为，一两梧州制药集团股份有限公司产品，细胞外信号调节蛋白激酶的抑制剂PD98059为CellSignalingTech公司产品。方法：全骨髓法体外分离纯化大鼠骨麓基质细胞，取传至第3代细胞进行诱导分化，设立3组：单纯诱导组向培养液中加入10ug／L碱性成纤维细胞生长因子，预诱导24h后全量换为正式诱导液（含10P-g／L碱性成纤维细胞生长因子、2％DMSO、200μmol／L丁羟回醚的α-MEM培养基），每24h半量换诱导液1次；三七总皂甙组向预诱导液和正式诱导液内加入终浓度100mg／L三七总皂甙；PD98059组在三七总皂甙组培养液基础上加入10μmol／LPD98059。主要观察指标：细胞形态学观察，MTT法检测细胞增殖情况，免疫组织化学方法鉴定细胞Nestin的表达。结果：诱导6h后，少数细胞呈锥形，细胞突起增多伸长，类似神经元，继续诱导培养后细胞突起增多，突起相互连接成网状。与单纯诱导组、PD98059组比较，诱导6，12，24h三七总皂甙组细胞均明显增殖（P〈005），且随诱导时间延长呈递增趋势（P〈0．05）：单纯诱导组、PD98059组间比较无明显差异（P〉0．05）。与单纯诱导组比较，诱导24h后三七总皂甙组Nestin阳性率明显升高（P〈0．05），PD98059组Nestin阳性率明显降低（P〈0．05）。结论：三七总皂甙可以促进骨髓基质细胞的神经分化和分化后增殖，细胞外信号调节蛋白激酶1／2的特异性抑制剂PD98059能够拈抗三七总皂甙促增殖分化作用，提示细胞外信号调节蛋白激酶1，2信号通路是三七总皂甙促进骨髓基质细胞向神经细胞分化和增殖的重要环节。

主 题 词：三七总皂甙 骨髓基质细胞 细胞外信号调节蛋白激酶1/2信号通路 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 071007[071007] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1673-8225.2009.23.024

馆 藏 号：203665551...