山羊IL-1β IL-8和Mx1因子实时荧光定量检测方法的建立

作     者：孙文超 易驰喆 汪伟 曹亮 张世亨 闭璟珊 韦显凯 辛佳亮 李文杰 张克龙 郑敏 鲁会军 张红云 苏姣秀 SUN Wen-chao;YI Chi-zhe;WANG Wei;CAO Liang;ZHANG Shi-heng;BI Jing-shan;WEI Xian-kai;XIN Jia-liang;LI Wen-jie;ZHANG Ke-long;ZHENG Min;LU Hui-jun;ZHANG Hong-yun;SU Jiao-xiu

作者机构：温州大学病毒学研究所浙江温州3250352 军事科学院军事兽医研究所吉林长春130122 广西动物疫病预防控制中心广西南宁530001 广西大学动物科技学院广西南宁530004 

基　　金：国家自然科学基金(31360601) 

出 版 物：《中国兽医杂志》 (Chinese Journal of Veterinary Medicine)

年 卷 期：2019年第55卷第1期

页      码：3-6页

摘      要：根据GenBank羊炎性细胞因子(IL-1β和IL-8)和Mx1保守序列,设计特异性引物,利用SYBR Green I染料法建立实时荧光定量检测方法。将羊IL-1β、IL-8和Mx1细胞因子基因保守区域克隆到pMD18-T载体,构建标准质粒。分别以标准质粒为模板建立荧光定量PCR反应的标准曲线、熔解曲线。结果表明,羊IL-1β、IL-8和Mx1细胞因子实时荧光定量检测方法Ct值与标准品呈良好的线性关系,R^2均大于0.990,所有稀释度标准品模板出现特异性熔解峰。应用所建立的方法对山羊痘病毒AV41感染山羊外周血淋巴细胞中IL-1β、IL-8和Mx1 mRNA表达水平进行检测,山羊痘病毒AV41可以刺激机体产生较高的炎性细胞因子。建立的羊IL-1β、IL-8和Mx1细胞因子荧光定量检测方法,可以为山羊痘病毒感染后分子免疫机制研究奠定基础。

主 题 词：山羊 炎性细胞因子和Mx1因子 Real-time PCR 

学科分类：090602[090602] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

馆 藏 号：203667811...