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奶牛乳腺CSN1S1基因线状与环状可变剪接体鉴定分析及功能探讨

奶牛乳腺CSN1S1基因线状与环状可变剪接体鉴定分析及功能探讨

作     者:陆文苑 王彦环 刘昀 李瑾婷 施晓宇 汪丽琴 张春雷 Lu Wenyuan;Wang Yanhuan;Liu Yun;Li Jinting;Shi Xiaoyu;Wang Liqin;Zhang Chunlei

作者机构:江苏师范大学生命科学学院徐州221000 

基  金:国家自然科学基金(31772558 31472077) 国家大学生实践创新训练计划项目(201610320018Z)共同资助 

出 版 物:《基因组学与应用生物学》 (Genomics and Applied Biology)

年 卷 期:2019年第38卷第4期

页      码:1545-1551页

摘      要:CSN1S1基因是调控奶牛乳汁中酪蛋白合成的一个重要基因。为鉴定分析奶牛CSN1S1基因可变剪接体种类及分布,验证其环状结构及表达能力,本研究根据牛CSN1S1基因m RNA序列(NM_181029.2)和不同外显子序列分别设计线状及环状引物,用PCR和RT-PCR技术克隆CSN1S1基因可变剪接体,筛选分析不同线状和环状可变剪接体及特征。结果发现:40个阳性克隆中,除全长CSN1S1 mRNA外,共获得12种CSN1S1线状可变剪接体,通过NCBI数据库比对分析确定了其序列组成及所占比重;检测到3种具有完整反向拼接的序列,同时发现多种滚环式结构,进一步确认环形RNA的存在;为验证环状可变剪接体能否表达,实验构建一种过表达载体pEGFP-CSN1S1-12~16 (包含CSN1S1基因12~16号外显子序列),转染293T细胞,48 h后在荧光显微镜下发现有绿色荧光效应,证明其具有翻译潜能。本研究成功筛选出不同线状与环状可变剪接体,并对其表达能力进行验证,为探讨如何提高牛奶酪蛋白合成提供新的依据。

主 题 词:CSN1S1基因 可变剪接体 环状RNA 

学科分类:0905[农学-林学类] 09[农学] 

核心收录:

D O I:10.13417/j.gab.038.001545

馆 藏 号:203669362...

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