SOE-PCR技术在羊口疮病毒真核表达质粒构建中的应用

作     者：钱林 李婷 鲜思美 曹熠 张友 徐松平 陈元翠 张益 包细明 饶体宇 吴伯梅 

作者机构：贵州大学动物科学学院贵阳550025 贵州省动物疫病研究所贵阳550025 贵州威宁自治县草地畜牧业发展中心贵州威宁553100 

基　　金：贵州省科技计划项目(黔科合支撑2264) 贵州省科学技术基金项目(黔科合LH字7667) 贵州省动物疫病防控与兽医公共卫生保障科技创新人才团队项目(黔科合人才团队4016号) 贵州大学2017年大学生创新创业训练计划项目(贵大(省)创字2017) 贵州大学2016年大学生"SRT计划"项目(贵大SRT字186号) 

出 版 物：《黑龙江畜牧兽医》 (Heilongjiang Animal Science And veterinary Medicine)

年 卷 期：2019年第9期

页      码：95-98页

摘      要：为了构建羊口疮病毒B2L和F1L基因融合真核表达质粒pVAX1-B2L-F1L,探讨制备安全可靠羊口疮病毒核酸双基因疫苗的可行性,试验通过Primer Premier 5.0软件设计B2L和F1L融合基因2对引物,应用SOE-PCR技术将B2L和F1L连接起来,用限制性内切酶消化后插入pVAX1真核表达载体中,构建B2L-F1L融合基因表达质粒,再转入大肠杆菌DH5α感受态细胞中,对真核表达质粒进行PCR鉴定、双酶切鉴定及序列测定。结果表明:利用SOE-PCR技术成功扩增出B2L-F1L融合基因;对真核表达质粒pVAX1-B2L-F1L进行PCR鉴定和双酶切鉴定后,均可得到与预期大小一致的DNA片段;测序发现,真核表达质粒目的基因序列与预期设计一致。说明真核表达质粒pVAX1-B2L-F1L构建成功。

主 题 词：羊口疮病毒 基因融合 SOE-PCR F1L基因 B2L基因 真核表达质粒 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.13881/j.cnki.hljxmsy.2018.04.0213

馆 藏 号：203669606...