水稻miR395d基因过表达载体的构建及功能初步分析

作     者：王文文 孙红正 李俊周 彭廷 杜彦修 张静 赵全志 Wang Wenwen;Sun Hongzheng;Li Junzhou;Peng Ting;Du Yanxiu;Zhang Jing;Zhao Quanzhi

作者机构：河南农业大学农学院河南粮食作物协同创新中心河南省水稻生物学重点实验室郑州450002 

基　　金：河南省基础与前沿技术研究项目(162300410159) 国家留学基金委-河南省地方合作项目(201408410185)共同资助 

出 版 物：《分子植物育种》 (Molecular Plant Breeding)

年 卷 期：2019年第17卷第9期

页      码：2876-2881页

摘      要：为研究miR395调控水稻硫吸收和同化的分子机制,我们通过生物信息学的分析方法,设计了水稻mi R395d基因的前体序列,将其连接到pHB载体上,从而构建了miR395d的过表达载体,随后通过农杆菌介导法转化水稻品种日本晴,获得10组转基因株系。采用潮霉素抗性筛选鉴定阳性转基因植株,在潮霉素溶液中能正常生长的为阳性植株,反之则为假阳性植株,并利用qRT-PCR的方法验证miR395d的表达量。结果表明,阳性转基因株系OE-2、OE-3和OE-4中miR395d基因表达量显著升高,说明miR395d的过表达载体构建成功。初步分析miR395d过表达植株的功能发现,在缺硫的水平下,与日本晴相比,miR395d过表达水稻植株叶片出现萎黄、植物生物量显著降低、根长显著变短等表型,其生长发育受到抑制。由于硫是植物生长所需营养元素之一,对植物生长发育及作物产量和品质均存在重要影响。miR395d过表达水稻株系的构建,为后续进一步研究miR395在水稻硫吸收和同化路径中的作用提供了材料。

主 题 词：水稻(Oryza sativa) miR395d 基因表达 载体构建 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 090102[090102] 

D　O　I：10.13271/j.mpb.017.002876

馆 藏 号：203669654...