实验用西藏小型猪CYP3A基因的克隆及序列分析

作     者：卢康荣 白静 张嘉宁 顾为望 黄黎珍 王万山 LU Kang-rong;BAI Jing;ZHANG Jia-ning;GU Wei-wang;HUANG Li-zhen;WANG Wan-shan

作者机构：南方医科大学基础医学院广东广州510515 华南理工大学生物科学与工程学院广东广州510515 南方医科大学实验动物中心广东广州510515 

基　　金：广东省科技计划项目(2011B060300028 2012B040304010) 

出 版 物：《现代生物医学进展》 (Progress in Modern Biomedicine)

年 卷 期：2019年第19卷第7期

页      码：1218-1221页

摘      要：目的:克隆西藏小型猪CYP3A基因并与人及其它小型猪品种进行序列比对分析。方法:根据Genebank数据库设计引物,取西藏小型猪新鲜肝脏组织,Trizol法提取肝脏总RNA,应用RT-PCR反转获得肝脏cDNA。分别扩增基因CYP3A46、CYP3A22、CYP3A29及CYP3A39,PCR片段回收后分别连接pMD-18T载体,获得重组质粒pT-CYP3A,阳性重组克隆送测序。采用NCBI Blast及vector NTI软件进行序列比对分析。结果:CYP3A46、CYP3A22、CYP3A29及CYP3A39基因编码序列全长1512 bp,编码503个氨基酸,与人CYP3A4相同。其中CYP3A22和CYP3A39与NCBI记录巴马小型猪序列相同;CYP3A46与巴马小型猪CYP3A46(NM_001134824.1)有6个位点碱基不同。CYP3A29与巴马小型猪CYP3A46(EU918131.1)亦有6个位点碱基不同。对来自2个母本后代猪的基因经过PCR扩增后测序发现CYP3A46、CYP3A29序列完全一致。结论:成功克隆西藏小型猪CYP3A的4个基因,其中CYP3A46与人CYP3A4的序列相似性最高。所得CYP3A46与CYP3A29序列可能为西藏小型猪独有。

主 题 词：细胞色素P450酶 西藏小型猪 克隆 序列分析 

学科分类：10[医学] 

D　O　I：10.13241/j.cnki.pmb.2019.07.004

馆 藏 号：203670432...