HBV X区基因部分序列的亚克隆与PCR检测

作     者：袁媛 陈强 杨继红 熊国梅 刘中来 YUAN Yuan,CHEN Qiang,YANG Ji-hong,LIU Zhong-lai (College of life science,Central China Normal University,Wuhan 430079,Hubei,China)

作者机构：华中师范大学生命科学学院武汉430079 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(No.40172005) 

出 版 物：《现代生物医学进展》 (Progress in Modern Biomedicine)

年 卷 期：2006年第6卷第8期

页      码：4-6,9页

摘      要：目的:探讨HBV X区基因用于乙型病毒性肝炎早期诊断价值和意义。方法:设计特异性引物,将pBR322-HBV质粒X区部分序列PCR产物AT亚克隆至pBS-T载体,提取和纯化质粒DNA,再对HBV X区序列进行PCR扩增。结果:获得了预期希望的质粒。PCR的最佳退火温度为51℃,灵敏度达到101拷贝/2μl,线性范围101-1010拷贝/2μl。讨论:pBR322-HBV质粒中的靶基因成功地被亚克隆至pBS-T载体。pBR322-HBV中X区目的序列扩增产物为57bp,该小片段勿需纯化就可直接AT亚克隆至新载体,有利于后续的常规PCR检测和TaqMan MGB荧光定量PCR检测。

主 题 词：乙型肝炎病毒 X区基因 亚克隆 灵敏度 

学科分类：1004[医学-公共卫生预防医学类] 100401[100401] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1673-6273.2006.08.002

馆 藏 号：203670843...