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DNA芯片联合检测耐利福平与异烟肼结核分枝杆菌及其临床应用

DNA芯片联合检测耐利福平与异烟肼结核分枝杆菌及其临床应用

作     者:叶淦湖 麦宝媛 刘芳 欧阳新根 李健青 廖生赟 YE Gan-hu;MAI Bao-yuan;LIU Fang;OUYANG Xin-gen;LI Jian-qing;LIAO Sheng-yun

作者机构:东莞市石碣人民医院广东东莞518057 东莞市高步医院检验科广东东莞523000 亚能生物技术深圳有限公司广东深圳518000 

基  金:香港特区政府创新科技基金(SERAP:S/P599/03A) 

出 版 物:《中华医院感染学杂志》 (Chinese Journal of Nosocomiology)

年 卷 期:2009年第19卷第9期

页      码:1045-1047,1057页

摘      要:目的开发快速检测耐利福平与异烟肼结核分枝杆菌rpoB、katGi、nhA基因突变的DNA芯片。方法根据结核分枝杆菌rpoB、katGi、nhA基因序列设计探针并制作基因芯片,从临床样品中分离出结核分枝杆菌的基因组DNA,PCR扩增含有上述几个基因突变位点的特异DNA片段,并事先在PCR引物的5′端作生物素标记,然后与膜条芯片上的检测特异突变位点的寡核苷酸探针进行杂交,通过生物素-链霉亲和素-过氧化物酶体系显色,直接观察突变情况,以此来判断耐药结果。结果35个利福平和异烟肼单耐药或多药耐药的结核分枝杆菌中有82.9%用芯片法检出的结果与药敏培养法一致;其中利福平耐药样品突变检出率为100.0%;有20.0%异烟肼耐药的样品芯片未检出突变,可能是突变发生在芯片检测位点范围之外。结论用DNA芯片检测结核分枝杆菌对利福平和异烟肼的耐药性,具有较高的特异性和敏感性,可用于临床结核分枝杆菌耐药性检测。

主 题 词:结核分枝杆菌 rpoB katG inhA基因 利福平 异烟肼 DNA芯片 

学科分类:1007[医学-药学类] 100705[100705] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

D O I:10.3321/j.issn:1005-4529.2009.09.008

馆 藏 号:203671798...

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