用于检测仔猪致病菌的23S rRNA基因芯片的研制

作     者：伍诚意 曹峰子 梁之昶 章振华 杨兵 周宏专 季海峰 陈小玲 

作者机构：北京市农林科学院畜牧兽医研究所北京100097 江西生物科技职业学院江西南昌330200 河北农业大学动物科技学院河北保定071000 北京华大吉比爱生物技术有限公司北京101300 首都师范大学生命科学院北京100037 

基　　金：北京市科技合同项目(Z0006321000191) 

出 版 物：《中国兽医科学》 (Chinese Veterinary Science)

年 卷 期：2010年第40卷第3期

页      码：258-264页

摘      要：以副猪嗜血杆菌、胸膜肺炎放线杆菌、多杀性巴氏杆菌、大肠杆菌、肠道沙门氏菌、猪链球菌等12种仔猪致病菌为目标细菌,23SrRNA基因为靶基因,从GenBank中下载其23SrDNA全序列,在其变异区设计特异性探针,在保守区设计通用引物。通过序列分析、PCR靶标与探针杂交试验,建立了有13条寡核苷酸探针和2对通用引物的仔猪常见致病菌基因芯片检测方法。以参考菌株粗提基因组DNA的10倍系列稀释模板做PCR,扩增产物与探针杂交,检出芯片的灵敏度为100fg。对33个参考菌株用芯片检测,结果有1例不正确,只鉴定到属;在61个野外分离株中,55株的芯片检测结果与生化或测序结果一致,有6例不一致,符合率为90%。初步研究证明,该检测方法能快速、有效地鉴定多种仔猪常见致病菌,但要区分某些细菌的致病株与非致病株,还要检测毒力/毒素基因。

主 题 词：仔猪 致病菌 23S rRNA基因 芯片 寡核苷酸探针 

学科分类：090603[090603] 08[工学] 09[农学] 0906[农学-水产类] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录：

D　O　I：10.16656/j.issn.1673-4696.2010.03.008

馆 藏 号：203672152...