蛋白表达的亚细胞定位影响基因免疫诱导的体液免疫应答水平的研究

作     者：杨军 陈晓黎 王一理 司履生 YANG Jun;CHEN Xiao-li;WANG Yi-li;SI Lü-sheng

作者机构：西安交通大学医学院第二附属医院病理科710004 西安交通大学生命科学与技术学院癌症研究所生物医学信息工程教育部重点实验室710061 

基　　金：国家自然科学基金(30300305) 教育部"新世纪优秀人才支持计划"(NCET-10-0647) 教育部博士点新教师基金(2007-0698106) 

出 版 物：《中国医药生物技术》 (Chinese Medicinal Biotechnology)

年 卷 期：2012年第7卷第4期

页      码：270-275页

摘      要：目的研究表达产物的不同亚细胞定位对基因免疫诱导的体液免疫应答水平的影响,为基因疫苗的设计提供参考。方法利用分子克隆技术,分别构建能表达不同细胞定位的EGFP-HPVl6L1融合蛋白和截短型EGFP-HPV16L1△NLS融合蛋白的重组pcDNA-EGFP-HPV16L1和pcDNA-EGFPHPV16L1△NLS真核表达载体;通过转染CHO细胞,并在倒置荧光显微镜下观察表达产物的细胞定位;用重组pcDNA载体免疫BALB/c小鼠;EGFP作为抗原,ELISA法检测血清抗体吸光度。结果①重组pcDNA-EGFP-HPV16L1转染的CHO细胞核内可见到绿色荧光,pcDNA-EGFP-HPV16L1△NLS真核表达载体转染的CHO细胞质内可见到绿色荧光:②两种不同的重组pcDNA载体均可诱导BALB/c小鼠体液免疫反应,但重组pcDNA-EGFP-HPV16L1△NLS真核表达载体免疫组小鼠IgG抗体A_(450)值显著高于重组pcDNAEGFP-HPV16L1真核表达载体免疫组小鼠IgG抗体A_(450)值(P<0.001)。结论表达产物的不同细胞定位可影响基因免疫诱发的体液免疫应答水平,定位于细胞质内的蛋白分子较定位于细胞核的蛋白分子能诱导机体更强的体液免疫反应,这为以增强体液免疫反应为目的的基因疫苗的设计提供了参考。

主 题 词：抗体生成 免疫疗法 核定位信号 基因免疫 

学科分类：1001[医学-基础医学] 100102[100102] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2012.04.004

馆 藏 号：203673271...