棉花GhPAO3基因的CRISPR/Cas9表达载体的构建

作     者：朱雪峰 田文刚 熊显鹏 薛飞 张莉 朱华国 ZHU Xue-feng;TIAN Wen-gang;XIONG Xian-peng;XUE Fei;ZHANG Li;ZHU Hua-guo

作者机构：石河子大学/新疆生产建设兵团绿洲生态农业重点实验室 

基　　金：国家自然科学基金(31660427) 兵团现代农业科技成果转化计划(2015AC007)~~ 

出 版 物：《新疆农业科学》 (Xinjiang Agricultural Sciences)

年 卷 期：2019年第56卷第2期

页      码：226-232页

摘      要：【目的】研究棉花GhPAO3基因的功能,通过CRISPR/Cas9技术构建棉花GhPAO3基因的基因编辑载体。【方法】筛选合适的两个PAM位点设计引物,在引物中添加接头,重叠延伸PCR,将两个靶标片段连接在一起。通过限制性核酸内切酶BsaⅠ对pRGEB32-7载体进行单酶切,使用一步法连接重叠延伸产物与线性化的pRGEB32-7载体。【结果】使用电击转化法将构建好的棉花GhPAO3基因的基因编辑载体转入农杆菌LBA4404感受态,通过卡那霉素筛选阳性单克隆菌株。【结论】条带大小与预期一致,棉花GhPAO3基因的基因编辑载体构建成功。

主 题 词：棉花 CRISPR/Cas9 基因编辑 GhPAO3 

学科分类：09[农学] 0901[农学-植物生产类] 

D　O　I：10.6048/j.issn.1001-4330.2019.02.004

馆 藏 号：203674725...