肉鸡硫氧还蛋白原核表达载体的构建、蛋白纯化及其活性鉴定

作     者：余文兰 胡莲美 王朵朵 吴富旺 张晓战 郭凯 郭剑英 唐兆新 

作者机构：华南农业大学兽医学院广东广州510642 中国科学院华南植物园广东广州510642 

基　　金：广东省科技计划资助项目(2011B020306009) 

出 版 物：《中国兽医学报》 (Chinese Journal of Veterinary Science)

年 卷 期：2014年第34卷第6期

页      码：942-945页

摘      要：根据GenBank中肉鸡硫氧还蛋白(Trx)基因的cDNA序列及载体pET28a(+)中的多克隆位点设计引物,进行Trx克隆和原核表达载体的构建,并在大肠杆菌中表达。应用镍柱亲和层析对该融合蛋白进行纯化;采用胰岛素还原法对重组Trx进行活性鉴定。结果显示:成功构建了pET28a-Trx重组质粒,纯化的目的蛋白纯度可达到90%,质量浓度为4g/L。纯化的重组Trx(GgTrx)具有较高的还原胰岛素二硫键能力,并且呈现出浓度依赖效应。本研究为Trx蛋白应用于治疗氧化应激性疾病奠定了基础。

主 题 词：硫氧还蛋白 肉鸡 原核表达 蛋白纯化 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录：

D　O　I：10.16303/j.cnki.1005-4545.2014.06.014

馆 藏 号：203675458...