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不结球白菜L-半乳糖酸-1,4-内酯脱氢酶基因(GLDH)cDNA片段克隆与RNAi表达载体构建

不结球白菜L-半乳糖酸-1,4-内酯脱氢酶基因(GLDH)cDNA片段克隆与RNAi表达载体构建

作     者:高红亮 李英 宋玉萍 马成英 侯喜林 GAO Hong-liang;LI Ying;SONG Yu-ping;MA Cheng-ying;HOU Xi-lin

作者机构:南京农业大学园艺学院/作物遗传与种质创新国家重点实验室江苏南京210095 

基  金:国家自然科学基金项目(30500343) 

出 版 物:《南京农业大学学报》 (Journal of Nanjing Agricultural University)

年 卷 期:2008年第31卷第4期

页      码:20-24页

摘      要:根据植物中hpRNA(hairpin RNA)原理,选择GLDH基因cDNA序列同源性较低区域设计1对携带双酶切位点的特异引物,以不结球白菜‘苏州青’叶片为材料提取总RNA,利用RT-PCR技术克隆了GLDH基因片段。构建中间克隆载体,经过3次亚克隆将测序正确的GLDH基因片段分别以正向和反向两种形式插入到间隔基因YYT的两端,经鉴定已插入到植物表达载体中,成功地构建了干扰GLDH基因表达的RNAi植物双元表达载体pRNAi-GLDH,并将表达载体转化到农杆菌菌株LBA4404中,为深入研究GLDH基因功能提供有效的工具。

主 题 词:不结球白菜 GLDH基因 RNAi植物双元表达载体 

学科分类:09[农学] 0902[农学-自然保护与环境生态类] 090202[090202] 

核心收录:

D O I:10.3321/j.issn:1000-2030.2008.04.004

馆 藏 号:203680145...

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