副溶血性弧菌实时重组酶聚合酶扩增检测技术研究

作     者：占利 徐昌平 张云怡 陈鸿鹄 张政 陈建才 张俊彦 梅玲玲 ZHAN Li;XU Chang-ping;ZHANG Yun-yi;CHEN Hong-hu;ZHANG Zheng;CHEN Jian-cai;ZHANG Jun-yan;MEI Ling-ling

作者机构：浙江省疾病预防控制中心 

基　　金：浙江省分析测试科技计划项目(2018C37017) 国家科技重大专项(2018ZX10714002) 

出 版 物：《预防医学》 (CHINA PREVENTIVE MEDICINE JOURNAL)

年 卷 期：2019年第31卷第7期

页      码：653-657页

摘      要：目的建立快速检测副溶血性弧菌的实时重组酶聚合酶扩增技术(RPA)。方法根据副溶血性弧菌tlh基因保守序列设计筛选引物及探针,建立检测副溶血性弧菌的实时RPA方法。通过检测不同浓度副溶血性弧菌标准株DNA模板评价方法灵敏度,通过检测不同种属弧菌及其他细菌标准株评价方法特异度,通过重复试验评价方法稳定性,通过实样检测评价方法应用效果。结果建立的实时RPA方法在39℃恒温下20min内完成副溶血性弧菌扩增,最低检测限为5pg/反应,与其他致病菌无交叉反应,不同浓度的副溶血性弧菌DNA模板和大肠杆菌DNA模板隔日3次实时RPA检测结果一致,实时RPA对51份鲜活/冰鲜鱼、虾、贝、蟹类样品的检测结果与GB4789.7—2013《食品微生物学检验副溶血性弧菌检验》检测结果一致。结论建立的实时RPA方法可定性检测副溶血性弧菌,且实验操作及结果判读简单,适用于突发公共卫生事件、食品安全监管中的副溶血性弧菌快速检测。

主 题 词：副溶血性弧菌 重组酶聚合酶扩增技术 检测 tlh基因 

学科分类：1004[医学-公共卫生预防医学类] 100403[100403] 10[医学] 

D　O　I：10.19485/j.cnki.issn2096-5087.2019.07.002

馆 藏 号：203680589...