应用环介导等温扩增技术快速检测单核细胞增生李斯特菌的研究

作     者：唐梦君 高玉时 周生 张小燕 唐修君 蒲俊华 葛庆联 Tang Mengjun;Gao Yushi;Zhou Sheng;Zhang Xiaoyan;Tang Xiujun;Pu Junhua;Ge Qinglian

作者机构：农业部家禽品质监督检验测试中心江苏扬州225003 中国农业科学院家禽研究所江苏扬州225003 

基　　金：江苏省科技创新与成果转化专项引导资金(NO.BM2009908) 

出 版 物：《中国动物检疫》 (China Animal Health Inspection)

年 卷 期：2010年第27卷第9期

页      码：25-28页

摘      要：目的建立环介导等温扩增技术快速检测单核细胞增生李斯特菌。方法根据单核细胞增生李斯特菌(LM)hlyA基因序列中的保守区域,采用在线引物设计软件Primer Explorer4.0进行设计,获得一套特异性的环介导等温扩增(LAMP)引物,对单核细胞增生李斯特菌hlyA基因进行LAMP扩增,并与常规PCR方法进行比较。结果建立的LAMP方法能成功扩增出梯形条带,LAMP检测单核细胞增生李斯特菌纯培养物和人工染菌的灵敏度为5.44×102cfu/mL,而对照PCR检测的灵敏度为5.44×104cfu/mL。对10株细菌进行LAMP扩增,仅单核细胞增生李斯特菌得到阳性结果。从DNA提取到报告结果,耗时仅1h。结论 LAMP检测单核细胞增生李斯特菌灵敏度高,特异性强,耗时短,方法简便,有望发展成为快速检测食品中单核细胞增生李斯特菌的有效手段。

主 题 词：单核细胞增生李斯特菌 环介导等温扩增技术 hlyA基因 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1005-944X.2010.09.015

馆 藏 号：203681399...