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CD147-shRNA对肝癌细胞CD147表达的抑制作用

CD147-shRNA对肝癌细胞CD147表达的抑制作用

作     者:宫路路 林瑞新 李晓萌 张爱丽 文海荣 房学东 GONG Lulu;LIN Ruixin;LI Xiaomeng;ZHANG Aili;WEN Hairong;FANG Xuedong

作者机构:吉林大学普通外科疾病诊疗中心吉林大学第二医院普通外科吉林长春130041 东北师范大学生命科学学院吉林长春130022 

出 版 物:《中国普通外科杂志》 (China Journal of General Surgery)

年 卷 期:2010年第19卷第1期

页      码:41-47页

摘      要:目的构建CD147-shRNA重组质粒并检测其对肝癌细胞SMMC-7721和HepG2内源性CD147表达的抑制作用。方法根据Genebank中CD147序列设计3条特征性靶序列,合成的核苷酸序列连接到线性化pBS/U6载体,采用酶切法及测序鉴定重组质粒的正确性;将重组质粒转染至人肝癌细胞SMMC-7721和HepG2中,采用Western blot法和免疫荧光法观察该重组质粒对CD147内源性表达的抑制作用。结果酶切鉴定和测序证实成功构建pBS/U6/CD147-shRNA,且对人肝癌细胞SMMC-7721和HepG2 CD147表达有抑制作用,而以pBS/U6/CD147-shRNA3抑制作用最为显著。结论构建pBS/U6/CD147-shRNA成功,并筛选出基因抑制效果最佳的pBS/U6/CD147-shRNA3,为进一步实验打下了基础。

主 题 词:肝肿瘤 重组质粒,pBS/U6/CD147-shRNA RNA干扰 

学科分类:1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

馆 藏 号:203681610...

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