靶向抑制存活素基因对大肠癌细胞SW80侵袭和转移的实验研究

作     者：武金宝 南清振 马高峰 龚伟 陈琳 林英卓 王继德 张宏权 宋于刚 WU Jin-bao;NAN Qing-zhen;MA Gao-feng;GONG Wei;CHEN Lin;LIN Ying-zhuo;WANG Ji-de;ZHANG Hong-quan;SONG Yu-gang

作者机构：南方医科大学南方医院消化研究所 Karolinska Institute Department of Biosciences and NutritionSweden Huddinge SE-14157 

基　　金：国家自然科学基金(30171053)~~ 

出 版 物：《南方医科大学学报》 (Journal of Southern Medical University)

年 卷 期：2007年第27卷第7期

页      码：951-954页

摘      要：目的构建靶向存活素(survivin)基因的短发夹干扰RNA(shRNA)表达载体,导入人大肠癌细胞SW480中,研究靶向抑制survivin基因对SW480细胞侵袭和转移的影响。方法根据siRNA设计原则,在survivin序列中选取设计含19个核苷酸(19nt)的靶序列,间以9个核苷酸的茎环序列,两端分别加上对应的酶切位点,形成shRNA的DNA模板并克隆到shRNA表达载体pRNAT-U6.1/Neo中,获得靶向抑制survivin基因的sihNA表达载体pRNAT-U6.1/Neo-survivin;采用Lipofectamine2000TM转染试剂将干扰质粒pRNAT-U6.1/Neo-survivin导入到大肠癌细胞SW480中;用Westernblotting从蛋白水平检测干扰效果;分别采用肿瘤侵袭粘附实验和明胶酶谱分析法检测pRNAT-U6.1/Neo-survivin对SW480细胞的侵袭和转移潜能的影响。结果Survivin基因的蛋白表达均得到显著抑制;沉默SW480的survivin基因可以显著抑制SW480细胞的侵袭和转移潜能,而且survivin基因表达被抑制后,SW480细胞分泌基质金属蛋白酶明显减少。结论Survivin基因可能在SW480的侵袭和转移潜能中起重要作用,沉默SW480的survivin基因可以显著抑制其侵袭、转移和基质金属蛋白酶分泌,因而survivin影响SW480的侵袭和转移可能与调控基质金属蛋白酶分泌密切相关。

主 题 词：短发夹干扰RNA suvivin基因 大肠肿瘤 肿瘤转移 SW480细胞 基质金属蛋白酶-2 基质金属蛋白酶-9 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3321/j.issn:1673-4254.2007.07.005

馆 藏 号：203686404...