小干扰RNA特异性抑制淋巴细胞T-bet表达的研究

作     者：张维 李宝金 伊远学 吴立旋 刘晓平 陶剑平 ZHANG Wei;LI Bao-jin;YI Yuan-xue;WU Li-xuan;LIU Xiao-ping;TAO Jian-ping

作者机构：北京大学深圳医院肝胆腔镜外科广东深圳518036 中山大学中山医学院微生物学教研室广州510080 

基　　金：国家自然科学基金(30371386) 广东省自然科学基金(31010)~~ 

出 版 物：《第三军医大学学报》 (Journal of Third Military Medical University)

年 卷 期：2009年第31卷第13期

页      码：1291-1294页

摘      要：目的探讨体外转录法合成的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对人淋巴细胞T-bet基因表达及功能的影响。方法设计并合成4条siRNA(siRNA-1、siRNA-2、siRNA-3及siRNA-co),脂质体法转染淋巴细胞。转染后48h收集转染后细胞,采用RT-PCR方法检测细胞T-bet mRNA的抑制率;酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测细胞上清液中IL-4和IFN-γ水平;将淋巴细胞与人脐静脉血管内皮细胞(ECV304)共培养检测淋巴细胞对ECV304增殖的抑制作用。结果转染后48h半定量RT-PCR的检测显示siRNA-1、siRNA-2和siRNA-3转染后的淋巴细胞T-bet表达抑制率分别为(72.50±1.01)%、(5.40±0.63)%和(30.90±0.90)%,以siRNA-1转染后的淋巴细胞T-bet表达抑制作用最强(P<0.05),其细胞上清液中IL-4水平最高,而IFN-γ的水平最低(P<0.05),siRNA-1转染淋巴细胞对人脐静脉血管内皮细胞(ECV304)增殖的抑制作用低于siRNA-2及siRNA-3。结论siRNA可特异性抑制淋巴细胞T-bet基因的表达,从而为进一步研究siRNA在移植免疫耐受中应用提供了理论和实验基础。

主 题 词：RNA干扰 小干扰RNA 淋巴细胞 T—bet 

学科分类：1001[医学-基础医学] 100102[100102] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3321/j.issn:1000-5404.2009.13.017

馆 藏 号：203687164...