烟草中TMV、CMV和PVY多重RT-PCR检测体系的建立与应用

作     者：杨金广 张帅 申莉莉 钱玉梅 陈德鑫 王长栓 黄瑾 王凤龙 YANG Jin-guang;ZHANG Shuai;SHEN Li-li;QIAN Yu-mei;CHEN De-xin;WANG Chang-shuan;HUANG Jin;WANG Feng-long

作者机构：农业部烟草类作物质量控制重点开放实验室中国农业科学院烟草研究所青岛266101 广西区烟草公司百色市公司百色右江区城东大道533000 

基　　金：广西区烟草专卖局科技项目(合同号:2008-12 2008-14) 

出 版 物：《中国烟草学报》 (Acta Tabacaria Sinica)

年 卷 期：2010年第16卷第4期

页      码：83-88页

摘      要：利用DNAMAN软件对GenBank数据库中已登录的烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)、黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaicvirus,CMV)和马铃薯Y病毒(Potato virusY,PVY)全基因组序列进行序列比对,选择最保守的区域,进行相应病毒的引物设计,建立了多重RT-PCR检测烟草中TMV、CMV和PVY的技术体系。对3条扩增片段进行回收、测序和BLAST比较,结果表明多重RT-PCR所扩增的片段序列均与预期设计序列相符,同源性均在98%以上。利用多重RT-PCR对广西区132个烟草病毒病样品进行检测分析,结果表明TMV检出率为91.7%,CMV检出率为18.2%,PVY检出率为55.3%。较单一的RT-PCR,具有简便、快速和经济的特点。与酶联免疫吸附法(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)相比,其检测限度高出ELISA的检测限度104级数,具有更高的特异性与准确性。该方法可以同步快速、特异地检测出烟草中TMV、CMV和PVY病毒的侵染。

主 题 词：烟草 多重RT-PCR 病毒检测 应用 

学科分类：09[农学] 0904[农学-动物医学类] 090401[090401] 090402[090402] 

D　O　I：10.0000/j.zgycxb.1004-5708.20101665

馆 藏 号：203687654...