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利用正交设计优化大豆SRAP-PCR反应体系

利用正交设计优化大豆SRAP-PCR反应体系

作     者:王芳 王岚 周延清 WANG Fang;WANG Lan;ZHOU Yan-qing

作者机构:中州大学实验管理中心河南郑州450044 中州大学化工食品学院河南郑州450044 河南师范大学生命科学学院河南新乡453007 

基  金:河南省教育厅自然科学研究计划项目(编号:2008 A208018) 河南省教育厅自然科学研究计划项目(编号:2009B 180016)资助 

出 版 物:《种子》 (Seed)

年 卷 期:2014年第33卷第11期

页      码:78-81页

摘      要:以133个大豆品种为试验材料,通过正交试验设计,从Mg2+、Taq酶、d NTP、引物、模板5种因素4个水平对大豆SRAP反应体系进行优化,建立了适合于大豆的SRAP-PCR优化反应体系,该反应体系为:模板DNA 30 ng,Mg Cl22.0 mmol/L,d NTP250μmol/L,上下引物各0.5μmol/L,Taq DNA聚合酶1.5 U,1×PCR buffer 2.5μL,加双蒸水至终体积25μL。优化的PCR反应程序为:94℃预变性3 min;94℃变性1 min,35℃复性1 min,72℃延伸1 min,5个循环;94℃变性1 min,50℃复性1 min,72℃延伸7 min,35个循环。

主 题 词:大豆 SRAP 正交设计 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 07[理学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 090102[090102] 

D O I:10.3969/j.issn.1001-4705.2014.11.022

馆 藏 号:203689736...

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