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A型猪塞内卡病毒TaqMan荧光定量PCR方法的建立

A型猪塞内卡病毒TaqMan荧光定量PCR方法的建立

作     者:李秀博 刘存 鄢明华 崔玉东 崔尚金 LI Xiu-bo;LIU Cun;YAN Ming-hua;CUI Yu-dong;CUI Shang-jin

作者机构:黑龙江八一农垦大学动物科技学院大庆163319 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所北京1001931 农业部兽用药物与诊断技术北京科学观测实验站北京100193 天津畜牧兽医研究所天津300384 

基  金:中国农业科学院创新工程项目(ASTIP-IAS15) 国家重点研发项目(2017YFD0502300) 天津市生猪产业创新技术体系项目(ITTPRS2017003) 

出 版 物:《中国动物传染病学报》 (Chinese Journal of Animal Infectious Diseases)

年 卷 期:2019年第27卷第3期

页      码:33-38页

摘      要:本研究针对A型猪塞内卡病毒(Senecavirus A, SVA)基因组保守区域设计了特异性引物及探针,建立了快速检测SVA的Taq Man荧光定量PCR方法。结果显示,以构建的重组质粒为标准品建立的Taq Man荧光定量PCR方法,标准曲线具有良好的线性关系,线性相关系数达0.9974;特异性良好,与口蹄疫病毒、猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪瘟病毒、猪伪狂犬病毒不存在交叉反应;对SVA核酸最低检测下限为3.75 copies/μL,而普通PCR最低检测下限为3.75×103 copies/μL;批内和批间的变异系数为均小于5%,重复性良好。本研究建立的SVA TaqMan荧光定量PCR方法为检测猪水疱性疾病病原提供了一种快速、灵敏的检测方法,为开展SVA流行病学调查提供了技术支持。

主 题 词:A型猪塞内卡病毒 TaqMan荧光定量PCR 诊断 

学科分类:090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

馆 藏 号:203691173...

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