羊梭菌病快速鉴别PCR方法的建立及初步应用

作     者：李田美 吴正双 许大伟 姜艳芬 LI Tian-mei;WU Zheng-shuang;XU Da-wei;JIANG Yan-fen

作者机构：西北农林科技大学动物医学院陕西杨凌712100 内蒙古自治区动物卫生监督所内蒙古呼和浩特010051 

基　　金：国家重点研发计划项目(2018YFD0500504) 陕西省农业科技创新与攻关项目(2015NY171) 

出 版 物：《动物医学进展》 (Progress In Veterinary Medicine)

年 卷 期：2019年第40卷第7期

页      码：20-25页

摘      要：根据GenBank已公布的产气荚膜梭菌和腐败梭菌的α毒素基因序列,分别设计并合成针对2种α毒素基因的特异性引物,通过扩增条件的优化,建立快速鉴别产气荚膜梭菌和腐败梭菌的双重PCR方法。特异性试验显示,产气荚膜梭菌和腐败梭菌参考菌株均扩增出了相应的预期目的条带,而大肠埃希菌、沙门菌、金黄色葡萄球菌和链球菌则均未能扩增出相应条带。灵敏度试验结果显示,产气荚膜梭菌和腐败梭菌基因组DNA最低检测量分别为17.95pg/μL和1.261pg/μL。应用该方法对样品进行检测,其中5份为产气荚膜梭菌阳性。成功建立了特异性强、敏感性高的双重PCR方法,可以有效进行产气荚膜梭菌和腐败梭菌的快速鉴别,对羊梭菌病病原快速鉴定及流行病学调查具有重要意义。

主 题 词：产气荚膜梭菌 腐败梭菌 α毒素 鉴别 双重PCR 

学科分类：090603[090603] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1007-5038.2019.07.004

馆 藏 号：203691244...