TaqMan–MGB探针荧光定量PCR检测致对虾急性肝胰腺坏死病副溶血弧菌

作     者：童桂香 黎小正 吴祥庆 黄鸾玉 黄光华 韦信贤 TONG Guixiang;LI Xiaozheng;WU Xiangqing;HUANG Luanyu;HUANG Guanghua;WEI Xinxian

作者机构：广西水产科学研究院广西南宁530021 广西水产遗传育种与健康养殖重点实验室广西南宁530021 

基　　金：广西水产畜牧科技推广应用项目(桂渔牧科201633022) 广西创新驱动发展专项(桂科AA17204081–4) 广西自然科学基金项目(2015GXNSFBA139069) 广西壮族自治区直属公益性科研院所基本科研业务费专项(GXIF–2016–10) 广西水产遗传育种与健康养殖重点实验室项目(17–259–29) 

出 版 物：《湖南农业大学学报（自然科学版）》 (Journal of Hunan Agricultural University(Natural Sciences))

年 卷 期：2019年第45卷第4期

页      码：405-411页

摘      要：根据pirAVp基因保守序列设计特异性引物和TaqMan-MGB探针,经优化反应体系及条件,建立检测致对虾急性肝胰腺坏死病副溶血弧菌(VpAHPND)的TaqMan-MGB探针荧光定量PCR方法;以重组质粒为标准品制作标准曲线,并进行特异性、敏感性、重复性及临床应用试验.结果表明:该方法定量范围宽,起始模板浓度范围为1×10^1~1×10^9拷贝/反应时,标准曲线具良好的线性关系;最低检测限约为10拷贝/反应,与对虾其他病原菌及病毒无交叉反应,重复试验变异系数为0.37%~0.47%,可在1h内完成单个样品检测;对临床对虾样品及水样的检测结果表明,与世界动物卫生组织(OIE)推荐的套式PCR法相比,可提高VpAHPND的阳性检出率,且检测为阳性的样品包含全部套式PCR法检测为阳性的样品.可见,应用TaqMan-MGB探针建立的检测VpAHPND的荧光定量PCR方法具有灵敏度高、特异性强、重复性好、能快速定量等优点,可用于临床对虾样品及水样的VpAHPND检测.

主 题 词：对虾 急性肝胰腺坏死病 副溶血弧菌 TaqMan–MGB探针 荧光定量PCR方法 

学科分类：0908[0908] 0906[农学-水产类] 09[农学] 

核心收录：

D　O　I：10.13331/j.cnki.jhau.2019.04.012

馆 藏 号：203695992...