鼠尿液中弓形虫B1基因实时荧光定量PCR检测方法的建立

作     者：骆方军 姚洪锋 王永明 谭峰 LUO Fang-jun;YAO Hong-feng;WANG Yong-ming;TAN Feng

作者机构：浙江省诸暨市人民医院检验科诸暨311800 温州医学院寄生虫学教研室温州325035 

基　　金：绍兴市科学技术局2008年科技计划(No2008D10037) 浙江省科技厅面上社会发展项目(No2009C33035)~~ 

出 版 物：《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 (Chinese Journal of Parasitology and Parasitic Diseases)

年 卷 期：2010年第28卷第5期

页      码：336-338页

摘      要：根据GenBank中弓形虫B1基因序列,设计1对引物和1条TaqMan探针。从感染弓形虫小鼠尿液提取弓形虫总DNA,先用普通PCR扩增获得目的基因产物,将纯化的回收产物与pMD18-T载体连接,测序证实为目的片段后,制备系列浓度参照品。再优化实时荧光定量PCR反应体系,并对体系的灵敏度、重复性、线性、特异性和参照品稳定性进行评价。其灵敏度为104拷贝/ml;批内变异系数为2.42%,批间变异系数为4.18%,线性为103～107拷贝/ml,特异性为100%,参照品稳定。该法检测鼠尿样弓形虫DNA具有方便、灵敏、特异和重复性好等优点。

主 题 词：小鼠 尿液 刚地弓形虫 实时荧光定量聚合酶链反应 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

核心收录：

馆 藏 号：203696874...