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模块化质粒系统用于水稻条斑病菌基因表达的分析

模块化质粒系统用于水稻条斑病菌基因表达的分析

作     者:杨小菲 李逸朗 吾尼尔别克·美丽 张翠萍 杨瑞环 李生樟 李映斌 陈晓斌 陈功友 邹丽芳 YANG Xiao-fei;LI Yi-lang;WUNIERBIEKE Mei-li;ZHANG Cui-ping;YANG Rui-huan;LI Sheng-zhang;LI Ying-bin;CHEN Xiao-bin;CHEN Gong-you;ZOU Li-fang

作者机构:上海交通大学农业与生物学院 

基  金:国家重点研发计划(2017YFD0200400) 国家自然科学基金(31470235 31772122) 

出 版 物:《上海交通大学学报(农业科学版)》 (Journal of Shanghai Jiaotong University(Agricultural Science))

年 卷 期:2019年第37卷第3期

页      码:77-86,94页

摘      要:水稻条斑病菌(Xanthomonas oryzae ***,Xoc)侵染水稻,引起细菌性条斑病(bacterial leaf streak,BLS)。近几年,在我国南方水稻产区,条斑病大面积发生,对水稻的安全生产构成严重威胁。为了准确地在Xoc中进行基因功能的分析,本研究设计出模块化的质粒系统,用于基因转录表达和蛋白表达的分析。为了验证该系统的可行性,选取hrpG、hrpX和hrpB1基因构建了相应的启动子载体和蛋白表达载体,将这些载体导入相应的hrp调控子基因trh、hrpG和hrpX的突变体中。GUS活性测定的结果显示,在XOM3培养基、寄主水稻组织和非寄主烟草组织中,启动子模块元件能够准确反映这3个hrp基因的调控表达模式。蛋白免疫杂交结果显示,HrpX蛋白表达水平反映的调控模式与hrpX启动子活性呈现的调控表达模式一致。水稻上致病性测定结果显示,有效表达的HrpG蛋白能够恢复hrpG突变体在寄主水稻上的致病性。这表明,这套模块化的载体系统能够有效应用于基因转录表达、蛋白表达和功能互补的分析。这将为Xoc-水稻互作研究提供有效的技术支持,加快Xoc毒性相关基因功能的研究。

主 题 词:水稻条斑病菌 hrp基因 启动子探针载体 蛋白表达载体 

学科分类:09[农学] 0904[农学-动物医学类] 090401[090401] 090402[090402] 

D O I:10.3969/J.ISSN.1671-9964.2019.03.013

馆 藏 号:203698060...

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