CHRNA7基因荧光定量PCR检测方法的建立

作     者：刘益巧 孙志华 钱江 长孙东亭 罗素兰 LIU Yiqiao;SUN Zhihua;QIAN Jiang;ZHANGSUN Dongting;LUO Sulan

作者机构：海南大学海洋学院/海南大学热带生物资源教育部重点实验室/海口市海洋药物重点实验室 

基　　金：国家自然科学基金项目(81872794) 

出 版 物：《热带生物学报》 (Journal of Tropical Biology)

年 卷 期：2019年第10卷第2期

页      码：178-183页

摘      要：为了检测烟碱型乙酰胆碱受体(nicotine acetylcholine receptors,nAChRs)α7亚基基因(CHRNA7)的表达,笔者根据人源CHRNA7基因序列设计引物,PCR扩增CHRNA7基因,亚克隆到pMD-18T载体中后,测序鉴定并制备重组质粒,以梯度稀释的重组质粒为模板,进行荧光定量PCR来绘制标准曲线,并进行灵敏度和重复性实验,成功建立了检测CHRNA7基因的荧光定量PCR方法。该方法最低可检测10 1 copies·μL^-1,且重复性良好,在10 4,10 5,10 6 copies·μL^-1时,5次重复的变异系数分别是1.22%,1.90%,2.63%。此外,还对人宫颈癌细胞SiHa和人正常宫颈细胞Ect1/E6E7中α7 nAChR亚基基因表达量进行检测,结果显示,α7 nAChR亚基在SiHa细胞系的表达明显低于其在Ect1/E6E7细胞系中的表达(P=0.015)。

主 题 词：α7 nAChR 宫颈癌 荧光定量PCR 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.15886/j.cnki.rdswxb.2019.02.013

馆 藏 号：203698725...