TGFβ1 shRNA对293细胞合成TGFβ1的干扰作用

作     者：柳国胜 王志军 文妍 罗瑶 刘海英 LIU Guo-sheng;WANG Zhi-jun;WEN Yan;LUO Yao;LIU Hai-ying

作者机构：暨南大学附属第一医院儿科广东广州510630 

基　　金：广东省自然科学基金资助项目(07005966) 

出 版 物：《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 (Journal of Jinan University(Natural Science & Medicine Edition))

年 卷 期：2009年第30卷第4期

页      码：420-424页

摘      要：目的:探讨自行设计的TGFβ1 shRNA对293细胞TGFβ1基因表达的干扰作用,为研究纤维化病变的基因治疗方法提供技术基础和依据。方法:针对大鼠TGFβ1基因mRNA序列,设计、合成携带3条TGFβ1 shRNA和TGFβ1基因的绿色荧光蛋白融合表达质粒载体,并设阴性质粒组和空质粒组为对照,通过脂质体包裹分别转染293细胞。转染后24、48和72 h收集细胞,在荧光显微镜下观察干扰效果,采用荧光定量PCR检测TGFβ1基因表达情况,并计算干扰效率。结果:荧光显微镜下观察,可见转染后24、48和72 h TGFβ1shRNA质粒组细胞绿色荧光强度均明显弱于阴性质粒组细胞,空质粒载体组未产生绿色荧光;荧光定量PCR检测转染后293细胞TGFβ1mRNA表达量,转染后24、48和72 h TGFβ1shRNA质粒组TGFβ1 mRNA表达量均显著低于阴性质粒组(P<0.01),其基因干扰效率则依次递减,分别为97.2%、97.1%和67.7%。结论:本研究证明自行设计的TGFβ1shRNA转染293细胞后24、48和72 h TGFβ1shRNA均能够高效干扰TGFβ1基因的表达,其基因干扰效率呈现一定的时间依赖性。

主 题 词：转化生长因子β1 RNA干扰 293细胞 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 1001[医学-基础医学] 100101[100101] 100201[100201] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1000-9965.2009.04.014

馆 藏 号：203700299...