TOX3基因RNAi慢病毒载体的构建及对乳腺癌ZR-75-1细胞增殖的影响

作     者：韩翠翠 刘立琨 王玉春 杨莹 刘吉成 周忠光 HAN Cui-cui;LIU Li-kun;WANG Yu-chun;YANG Ying;LIU Ji-cheng;ZHOU Zhong-guang

作者机构：齐齐哈尔医学院药学院齐齐哈尔161006 黑龙江中医药大学基础医学院哈尔滨150040 齐齐哈尔医学院医药科学研究院齐齐哈尔161006 

基　　金：齐齐哈尔医学院院内博士专项科研基金(QY2016B-19) 齐齐哈尔市科学技术局社会发展攻关项目(SFGG-201549) 黑龙江省普通本科高等学校青年创新人才培养计划项目(UNPYSCT-2018030) 

出 版 物：《生物技术通报》 (Biotechnology Bulletin)

年 卷 期：2019年第35卷第7期

页      码：141-147页

摘      要：旨在构建TOX3基因RNAi慢病毒载体并观察其对人乳腺癌ZR-75-1细胞增殖能力的影响。针对TOX3基因设计干扰靶序列,构建载体,测序正确后进行慢病毒包装及滴度测定。转染ZR-75-1细胞,荧光显微镜下观察表达GFP的细胞数目,实时荧光定量PCR及Western blot实验验证转染后ZR-75-1细胞中TOX3 mRNA和蛋白的表达。MTT及平板单克隆实验检测TOX3对ZR-75-1细胞增殖能力的影响。结果显示,各组载体序列正确,病毒滴度均>2×10^8 TU/mL,表达GFP细胞数目均可达95%以上。各干扰组TOX3 mRNA及蛋白表达水平均降低,其中TOX3-shRNA-3组干扰效果最佳,转染后ZR-75-1细胞的增殖和单克隆形成能力下降。成功构建TOX3基因的RNAi慢病毒载体,沉默TOX3后ZR-75-1细胞的增殖能力下降。

主 题 词：TOX3基因 慢病毒载体 RNA干扰 ZR-75-1细胞 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2018-0868

馆 藏 号：203700825...