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麻花鸡副黏病毒ZH-1株F基因真核表达载体的构建

麻花鸡副黏病毒ZH-1株F基因真核表达载体的构建

作     者:李红丽 詹丽娥 乔忠 王彩先 陆冰洋 LI Hong-li;ZHAN Lie;QIAO Zhong;WANG Cai-xian;LU Bing-yang

作者机构:山西省农科院畜牧兽医研究所山西太原030032 

基  金:山西省自然科学基金资助项目(2008011072) 

出 版 物:《华北农学报》 (Acta Agriculturae Boreali-Sinica)

年 卷 期:2009年第24卷第3期

页      码:54-58页

摘      要:将麻花鸡副黏病毒ZH^-1株毒种接种于11日龄SPF鸡胚,收集48-96 h死亡的鸡胚尿囊液。参考已发表的鸡源副黏病毒F基因序列,设计并合成了一对特异性引物,用以扩增麻花鸡副黏病毒ZH^-1株F基因,预期扩增的F基因片段包含完整的开放阅读框。通过RT-PCR扩增出麻花鸡副黏病毒ZH^-1株F基因片段,琼脂糖凝胶电泳回收、纯化,得到F基因片段,经EcoRⅠ和SalⅠ消化,将F基因克隆进入PCI-neo载体,转化大肠杆菌DH5α,挑选菌落,经限制性核酸内切酶SalⅠ和EcoRⅠ双酶切及PCR鉴定,结果证明重组真核表达载体PCI-neo-F构建成功,为下一步在哺乳动物细胞Vero细胞中表达打下良好的基础。扩增的F基因测序后,与其他禽副黏病毒1型F基因进行系统发育树的分析比较,为阐明麻花鸡副黏病毒ZH^-1株的遗传背景奠定了基础。

主 题 词:麻花鸡副黏病毒 F基因 序列分析 重组质粒 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录:

馆 藏 号:203702508...

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