肝癌Hep3B细胞HLA-G过表达对NK细胞体外杀伤作用的影响

作     者：曾宪成 张彤 李华 方天翎 聂常富 陈规划 ZENG Xian-cheng;ZHANG Tong;LI Hua;FANG Tian-ling;NIE Chang-fu;CHEN Gui-hua

作者机构：增城市人民医院普通外科广东增城511300 中山大学附属第三医院肝移植中心广东广州510630 广州医学院第一附属医院肝胆外科广东广州510120 郑州大学附属肿瘤医院肝胆外科河南郑州450003 

基　　金：国家重点基础研究发展规划(国家973规划)资助项目(No.2009CB522404) 教育部博士点基金(No.20100171120087) 广东省自然科学基金资助项目(No.10451130001004472) 增城市科技创新扶持基金资助项目(No.ZC201004) 

出 版 物：《中国病理生理杂志》 (Chinese Journal of Pathophysiology)

年 卷 期：2012年第28卷第4期

页      码：613-618页

摘      要：目的:探讨肝癌Hep3B细胞白细胞抗原-G(HLA-G)过表达对NK细胞体外杀伤作用的影响。方法:实验分为正常对照组(无干预措施,Hep3B组)、空载体对照组(转染空质粒,Hep3B-GFP组)和实验组(转染pEGFP-C1-HLA-G质粒,Hep3B-HLA-G组)。构建HLA-G真核表达质粒,转染至Hep3B细胞,经G418筛选,建立稳定过表达HLA-G的肝癌Hep3B细胞。Real-time PCR及Western blotting检测肝癌Hep3B细胞HLA-G mRNA及蛋白质水平的表达。分析肝癌Hep3B细胞HLA-G过表达及HLA-ABC抗体封闭靶细胞相应位点对NK细胞体外杀伤作用的影响。结果:经酶切及测序鉴定证实,插入序列与设计的序列相符。Real-time PCR和Western blotting结果均表明,转染重组质粒的Hep3B细胞HLA-G过表达(P<0.01)。NK细胞对转染pEGFP-C1-HLA-G的Hep3B细胞杀伤作用明显降低(P<0.01),HLA-ABC单抗封闭靶细胞相应位点后,NK细胞对Hep3B、Hep3B-GFP和Hep3B HLA-G细胞的杀伤均增加(P<0.01)。结论:pEGFP-C1-HLA-G表达载体可有效增加HLA-G表达,HLA-G过表达可以削弱NK细胞对肝癌细胞的杀伤效应。HLA-ABC单抗封闭靶细胞相应位点后,NK细胞对靶细胞的杀伤能力普遍有所提高。

主 题 词：人类白细胞抗原-G 基因重组 肝肿瘤 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1000-4718.2012.04.007

馆 藏 号：203703795...