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双重荧光定量RT-PCR法检测肠道病毒方法的建立及应用

双重荧光定量RT-PCR法检测肠道病毒方法的建立及应用

作     者:葛霞琴 崔大伟 谢国良 陈理华 王祥 郑书发 余斐 秦志梅 范剑 陈凌晓 王帅 毛佳燕 陈瑜 

作者机构:浙江大学医学院附属第一医院检验科杭州310003 浙江大学医学院附属儿童医院儿科杭州310003 湖州市中心医院检验科浙江湖州313000 

基  金:"十二五"国家科技重大专项(2012ZX10004-210) 

出 版 物:《临床检验杂志》 (Chinese Journal of Clinical Laboratory Science)

年 卷 期:2012年第30卷第6期

页      码:421-423页

摘      要:目的建立检测肠道病毒(EV)、B1型柯萨奇病毒(CVB1)的双重荧光定量RT-PCR法。方法用Primer Express 3.0软件设计特异性引物和探针,优化双重荧光定量RT-PCR反应体系,建立标准曲线并评价该法的灵敏度、特异性和重复性,用该法检测150份病毒性心肌炎患儿治疗前肛拭子和29份治疗后粪便标本,并与文献提供的PCR法进行对比。结果该法对EV、CVB1型肠道病毒检测具有较高特异性,检出限均为2×10-2TCID50/mL;具有较好的重复性,CV均0.05)。结论建立的双重荧光定量RT-PCR法可同时检测并区分EV和CVB1型病毒,适用于病毒性心肌炎临床标本的检测。

主 题 词:肠道病毒 柯萨奇病毒B1 双重荧光定量逆转录聚合酶链反应 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 1004[医学-公共卫生预防医学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 100401[100401] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 10[医学] 

核心收录:

D O I:10.13602/j.cnki.jcls.2012.06.007

馆 藏 号:203703903...

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