不同吸附体系及因素水平对PCC中4类抗凝蛋白的影响研究

作     者：曹海军 王宗奎 胡吉军 王玉梅 叶生亮 杜晞 张学俊 袁靖 林方昭 李长清 

作者机构：中国医学科学院北京协和医学院输血研究所四川成都610052 贵州泰邦生物制品有限责任公司 

基　　金：2009年国家卫生行业科研专项(200902008-2) 

出 版 物：《中国输血杂志》 (Chinese Journal of Blood Transfusion)

年 卷 期：2012年第25卷第12期

页      码：1283-1287页

摘      要：目的探讨不同吸附体系及其柠檬酸钠、氯化钠、pH、电导4因素对凝血酶原复合物(PCC)中蛋白C、蛋白S、蛋白Z、抗凝血酶收率及比活的影响。方法选择柠檬酸钠、氯化钠、pH3因素3水平设计正交试验,配制9种PCC平衡吸附体系;凝胶平衡后,吸附血浆,洗涤、洗脱,制备PCC浓缩物;测定浓缩物中蛋白C和S、抗凝血酶活性、蛋白Z含量、总体积及蛋白浓度,获得四类抗凝蛋白收率及比活,比较不同吸附体系收率、比活总趋势;利用正交试验直观分析法分析柠檬酸钠、氯化钠、pH对蛋白C、S和Z收率及比活的影响;测定吸附体系电导率,分析电导率与4类抗凝蛋白收率及比活的关系。结果不同吸附体系4类抗凝蛋白收率及比活有较大差异,抗凝血酶二者均极低。柠檬酸钠对蛋白C收率及比活、蛋白S收率影响较大;pH对蛋白S比活、蛋白Z收率及比活影响极差分别为:0.120、6.847、0.716,高于其他因素;氯化钠对其影响均最小。柠檬酸钠浓度越低,蛋白C收率及比活越高,蛋白S收率则越低,0.015 mol/L水平蛋白Z收率为49.11%,高于其他水平,而蛋白S和Z比活最低;pH越低,蛋白Z收率则越高,pH7.0水平蛋白C和S收率及比活、蛋白Z比活最高;氯化钠浓度0.075 mol/L水平,蛋白C收率及比活、蛋白S和Z比活分别为:29.37%、0.533 IU/mg、0.401 IU/mg、2.362μg/mg,均高于其他水平,而蛋白S、Z收率最低。不同电导率条件,蛋白C收率及蛋白Z比活变化较大,其中蛋白Z与S收率、蛋白Z与S比活、蛋白C收率与比活变化趋势基本一致;(10.00±0.20)ms/cm条件,蛋白C、S和Z比活较高。结论不同吸附体系抗凝血酶收率及比活均极低,蛋白C、S和Z收率及比活间无规律性。氯化钠对蛋白C、S和Z收率及比活影响较小,柠檬酸钠、氯化钠、pH不同水平对蛋白C、S和Z收率影响效应无共性,0.01 mol/L柠檬酸钠,0.075 mol/L氯化钠、pH7.0水平蛋白C、S和Z比活最佳。电导率与四类抗凝蛋白收率及比活间无线性关系。

主 题 词：吸附体系 凝血酶原复合物 抗凝蛋白 收率 比活 

学科分类：1007[医学-药学类] 1002[医学-临床医学类] 1010[医学-医学技术类] 100215[100215] 10[医学] 

D　O　I：10.13303/j.cjbt.issn.1004-549x.2012.12.047

馆 藏 号：203704103...