四引物扩增受阻突变体系PCR在绵羊线粒体基因组SNP检测中的应用

作     者：陈晓勇 向海 O.H.D.Brahi 敦伟涛 赵兴波 Chen Xiao-yong;Xiang Hai;O.H.D.Brahi;Dun Wei-tao;Zhao Xing-bo

作者机构：中国农业大学动物科技学院北京100193 河北省畜牧兽医研究所保定071000 

基　　金：转基因生物新品种培育重大专项(2013ZX08009-002) 河北省农业科技成果转化资金项目(11220139D) 

出 版 物：《中国草食动物科学》 (China Herbivore Science)

年 卷 期：2013年第33卷第6期

页      码：5-8页

摘      要：为建立绵羊线粒体基因组SNP的四引物扩增受阻突变体系(tetra-primer amplification refractory mutation system,Tetra-primer ARMS)PCR检测方法,选择小尾寒羊线粒体T1112C和C11606T2个SNP,在等位基因特异PCR基础上,根据错配原理设计4条引物,优化PCR反应体系,采用琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物。结果表明:T1112C位点检测中,所有个体均能扩增出569 bp最长片段的外引物产物(阳性对照),扩增出349 bp片段的个体为野生型,扩增出263 bp片段的个体为突变型。C11606T位点检测中,所有个体均能扩增出572 bp最长片段的外引物产物(阳性对照),扩增出408 bp片段的个体为野生型,扩增出213 bp片段的个体为突变型。在每个线粒体多态位点均检测到野生型和突变型2种基因型,没有发现异质性。应用Tetra-primer ARMS PCR方法,经一次PCR即可判定线粒体SNP位点的基因型,该方法快速、简便,可应用于绵羊线粒体SNP分型。

主 题 词：四引物扩增受阻突变体系PCR 绵羊 线粒体 单核苷酸多态性 

学科分类：0905[农学-林学类] 09[农学] 090501[090501] 

D　O　I：10.3969/j.issn.2095-3887.2013.06.001

馆 藏 号：203704478...