基于实时荧光定量PCR和数字PCR的肉制品中牛源性成分检测

作     者：刘艳 王鸣秋 李诗瑶 朱必婷 杨硕 马弋 张莉 LIU Yan;WANG Ming-qiu;LI Shi-yao;ZHU Bi-ting;YANG Shuo;MA Yi;ZHANG Li

作者机构：湖北省食品质量安全监督检验研究院湖北武汉430073 湖北省食品质量安全检测工程技术研究中心湖北武汉430075 

基　　金：湖北省食品质量安全监督检验研究院基金项目(ZZLX2015004) 

出 版 物：《现代食品科技》 (Modern Food Science and Technology)

年 卷 期：2019年第35卷第7期

页      码：254-260页

摘      要：为了能够快速有效的检测出肉制品中牛源性成分,采用实时荧光定量PCR和数字PCR检测方法,检测肉制品中牛源成分。先依据牛肉单复制基因组特异区域,通过多序列比对设计特异性引物与探针,再利用苯酚-氯仿法提取标准品基因组DNA,确立实时荧光定量PCR和数字PCR两种方法的反应条件,测定DNA模版纯度及浓度可得实验提取的DNA溶液不含杂质,在此基础上构建牛源性成分荧光定量PCR标准曲线,检测两种方法的特异性、抗干扰性与肉制品中牛源性成分。分析实验结果可知,引物与探针在两种方法中均对牛肉有荧光信号显示,两种方法具有牛源性特异性,检测数值与实际样品数值基本一致,且两种方法抗干扰性较好,当存在其他肉类干扰时,仍可准确监测出牛源性,两种方法的最大误差分别为3.8%和4.0%;可定量检测不同肉制品中牛源性成分,两种方法均未检测出样品10牛肉丸中牛源性成分,验证了市面上确实存在假肉情况。说明所用方法能够准确、快速地检测出肉制品中的牛源性成分,适用于市场中肉制品的检测,对保障消费者的权益和健康具有十分重要的意义。

主 题 词：荧光定量PCR 数字PCR 肉制品 牛源性成分 检测 特异性 

学科分类：0832[0832] 1004[医学-公共卫生预防医学类] 081704[081704] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-轻工类] 070302[070302] 0703[理学-化学类] 083203[083203] 

D　O　I：10.13982/j.mfst.1673-9078.2019.7.035

馆 藏 号：203704842...