Survivin-ASODN对肝癌SMMC-7721细胞凋亡的促进作用及其机制

作     者：齐亚灵 赵文杰 方艳秋 陈玉强 孟德欣 王伟群 李尧 李文 QI Ya-ling;ZHAO Wen-jie;FANG Yan-qiu;CHEN Yu-qiang;MENG De-xin;WANG Wei-qun;LI Yao;LI Wen

作者机构：佳木斯大学基础医学院组织与胚胎学教研室黑龙江佳木斯154007 黑龙江省农垦二院内科黑龙江佳木斯154002 吉林省人民医院肿瘤生物治疗中心吉林长春130021 佳木斯大学附属第一医院普外科黑龙江佳木斯154000 佳木斯大学基础医学院生理学教研室黑龙江佳木斯154007 

基　　金：黑龙江省教育厅科研基金资助课题(11551509) 

出 版 物：《吉林大学学报（医学版）》 (Journal of Jilin University：Medicine Edition)

年 卷 期：2014年第40卷第4期

页      码：757-762,I0002页

摘      要：目的:应用反义寡核苷酸(ASODN)技术靶向抑制生存素(survivin)基因,研究其对肝癌SMMC-7721细胞凋亡的影响,阐明survivin反义寡核苷酸(survivin-ASODN)促进SMMC-7721细胞凋亡的作用机制。方法:设计合成survivin-ASODN序列(FAM荧光素标记)。利用脂质体介导法分别用浓度为100、200、300、400和600nmol·L-1 survivin-ASODN转染SMMC-7721细胞(ASODN转染组),并设空白对照组、空脂质体对照组和正义寡核苷酸(SODN)对照组。应用流式细胞术(FCM)检测不同浓度survivin-ASODN体外转染SMMC-7721细胞24、48和72h后SMMC-7721细胞凋亡率及细胞周期;Western blotting法检测survivin蛋白表达水平。结果:与各对照组比较,荧光素标记的ASODN转染SMMC-7721细胞24h后,细胞生长开始受到抑制,细胞凋亡率增加,呈现剂量-时间依赖性(P<0.05);作用48h后,ASODN转染组细胞在G1期前出现明显的亚二倍体凋亡峰,G0/G1期细胞明显减少(P<0.05),G2/M期细胞显著增加(P<0.05),细胞被阻滞于G2/M期。与各对照组比较,不同浓度ASODN转染组SMMC-7721细胞survivin蛋白表达水平下降(P<0.05),且随作用时间的延长而降低(P<0.05)。结论:survivin-ASODN通过抑制survivin蛋白表达、改变细胞周期进程等机制促进SMMC-7721细胞凋亡,并且呈现时间-剂量依赖性。

主 题 词：生存素 反义寡核苷酸 肝细胞癌 流式细胞术 转染 

学科分类：1007[医学-药学类] 1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.13481/j.1671-587x.20140413

馆 藏 号：203704942...