RGD-TAT-KDRsiRNA慢病毒载体构建及抗肿瘤活性

作     者：张俭丽 郑旭 王杰 ZHANG Jian-li;ZHENG Xu;WANG Jie

作者机构：沈阳医学院附属卫生学校基础护理教研室辽宁沈阳110034 沈阳市和平区疾病预防控制中心 沈阳医学院继续教育学院 

基　　金：辽宁省自然科学基金(201102214) 沈阳市科技局科技计划项目(F11-264-1-29) 

出 版 物：《中国公共卫生》 (Chinese Journal of Public Health)

年 卷 期：2015年第31卷第5期

页      码：594-597页

摘      要：目的构建精氨酰-甘氨酰-天冬氨酸(RGD)介导的穿膜肽(TAT)-血管内皮细胞生长因子受体(KDR)siRNA融合基因慢病毒载体,探讨其对人肺癌A549细胞的抑制效果。方法设计合成编码RGD的2条寡核苷酸链,克隆到p GC/TAT-KDR siRNA载体的TAT下游,构建TAT-RGD-KDR siRNA融合基因载体;慢病毒包装并感染A549细胞;通过Western blot和real-time PCR检测A549细胞KDR基因表达水平;通过噻唑蓝法、双色法流式细胞仪和Transwell侵袭实验检测KDR基因沉默对A549细胞凋亡和侵袭力的影响。结果测序和Blast比对证实重组载体中的RGD序列与设计一致;TAT-RGD-KDR siRNA融合基因慢病毒载体转染A540细胞KDR mRNA和蛋白表达水平分别为(22.7±3.9)%和(19.3±2.7)%,明显低于TAT-KDR siRNA融合基因慢病毒载体转染组,差异有统计学意义(P<0.01);该载体具有较强的抑制A549细胞增殖、促进细胞凋亡和抑制细胞体外侵袭力的作用。结论 TAT-RGD-KDR siRNA融合基因慢病毒载体通过抑制细胞KDR mRNA和蛋白表达,抑制A549细胞增殖和侵袭、促进细胞凋亡。

主 题 词：精氨酰-甘氨酰-天冬氨酸(RGD) 穿膜肽(TAT) 血管内皮细胞生长因子受体(KDR) TAT-RGD-KDR siRNA融合基因 慢病毒载体 

学科分类：1007[医学-药学类] 100705[100705] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

D　O　I：10.11847/zgggws2015-31-05-15

馆 藏 号：203712065...