新生隐球菌MIS1基因的siRNA表达载体的构建及鉴定

作     者：李秀丽 田媛 史玉玲 顾俊瑛 李晓建 刘至昱 马越娥 高飞 王茠茠 LI Xiu-li;TIAN Yuan;SHI Yu-lin;GU Jun-ying;LI Xiao-jian;LIU Zhi-yu;MA Yue-e;GAO fei;WANG Xiu-xiu

作者机构：上海第十人民医院皮肤科上海200072 第二军医大学药学院生化药学教研室上海200433 

出 版 物：《中国真菌学杂志》 (Chinese Journal of Mycology)

年 卷 期：2012年第7卷第1期

页      码：17-19,23页

摘      要：目的构建靶向新生隐球菌MIS1基因的siRNA重组表达载体质粒,并进行鉴定。方法根据GenBank的MIS1基因序列,按照载体要求设计单链引物,克隆到空载体psilencer4.1-CMV neo中,经过LiAc化学法将重组质粒转染到新生隐球菌细胞中并用G418筛选,利用real time PCR鉴定阳性细胞的MIS1基因水平。结果重组表达质粒Psilencer4.1-CMV-si-MIS1经PCR、双酶切及测序鉴定,结果证明重组表达载体构建成功,其能在mRNA水平显著抑制MIS1的表达。结论已成功构建新生隐球菌MIS1基因的siRNA表达载体,为深入研究MIs1在隐球菌相关疾病的发生及发展中的作用提供了技术手段。

主 题 词：新生隐球菌 RNA干扰 MIS1 

学科分类：1007[医学-药学类] 100705[100705] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1673-3827.2012.01.005

馆 藏 号：203712216...