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空肠弯曲杆菌LAMP检测方法的建立及初步应用

空肠弯曲杆菌LAMP检测方法的建立及初步应用

作     者:唐梦君 周生 张小燕 唐修君 顾荣 高玉时 TANG Meng-jun;ZHOU sheng;ZHANG Xiao-yan;TANG Xiu-jun;GU rong;GAO Yu-shi

作者机构:农业部家禽品质监督检验测试中心扬州225003 江苏省家禽科学研究所扬州225003 

基  金:江苏省自然科学基金(BK2010297 BK2010299) 江苏省家禽科学研究所博士基金(JQ201002)共同资助 

出 版 物:《中国人兽共患病学报》 (Chinese Journal of Zoonoses)

年 卷 期:2012年第28卷第9期

页      码:917-921页

摘      要:目的建立一种灵敏的环介导等温扩增方法(Loop-mediated Isothermal Amplification,LAMP)用于空肠弯曲杆菌(Campylobacter jejuni)的快速检测。方法根据已公布的空肠弯曲杆菌旋转酶基因(gyrA)设计引物,建立并优化LAMP反应体系,对检测方法的特异性和灵敏度进行验证,并运用该方法对我国不同地方鸡种空肠弯曲杆菌的携带率进行调查。结果该方法能扩增出典型的梯形条带,且扩增产物的酶切鉴定结果与理论值相符;对单增李斯特菌等8株实验菌株进行检测,仅空肠弯曲杆菌的LAMP结果为阳性;该方法检测空肠弯曲杆菌纯培养物的灵敏度为20cfu/mL,高于常规PCR;不同地方鸡种空肠弯曲杆菌携带率介于6%~90%之间,差异显著。结论本试验建立的空肠弯曲杆菌LAMP检测方法特异性强、灵敏度高,有望在临床样品检测中发挥作用。

主 题 词:空肠弯曲杆菌 环介导等温扩增技术 旋转酶基因 

学科分类:1007[医学-药学类] 100705[100705] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

核心收录:

D O I:10.3969/cjz.j.issn.1002-2694.2012.09.012

馆 藏 号:203712273...

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