巢式多重聚合酶链反应在腺病毒检测及分型中的应用

作     者：邓洁 钱渊 赵林清 朱汝南 王芳 孙宇 DENG Jie;QIAN Yuan;ZHAO Lin-qing;ZHU Ru-nan;WANG Fang;SUN Yu

作者机构：首都儿科研究所病毒研究室北京市感染与免疫中心实验室北京100020 

基　　金：北京市自然科学基金基础性研究资助项目(JS96004) 北京市科委新星计划资助项目(2004B34) 

出 版 物：《中华流行病学杂志》 (Chinese Journal of Epidemiology)

年 卷 期：2007年第28卷第8期

页      码：781-784页

摘      要：目的建立一种快速、敏感、特异的腺病毒检测及分型方法。方法根据编码腺病毒六邻体基因的核苷酸序列设计一对外引物(即通用引物),扩增产物为1278bp;再分别设计针对腺病毒六邻体基因3、7、11和21型特异性序列的4对内引物,扩增产物分别为502、311、880和237 bp。应用多重巢式聚合酶链反应(nest-PCR)技术将这4对引物用于同一聚合酶链反应管中,根据扩增产物在琼脂糖凝胶电泳上的大小,即可鉴别所测毒株的型别。结果3、7、11和21型腺病毒标准株和分离株分别产生预期的特异性扩增片段,与其他常见的呼吸道病毒等无交叉反应。118份经病毒分离和/或间接免疫荧光法确定为腺病毒阳性的急性呼吸道感染患儿临床标本中,腺病毒3型占64.4%(76/ 118),7型占31.4%(37/118),11型占2.5%(3/118),未检测到21型;2份病毒分离和间接免疫荧光均为腺病毒阳性的标本中,用该方法未能鉴定出型别,可能是3、7、11、21型以外的腺病毒,占1.7%(2/ 118)。33份经病毒分离和/或间接免疫荧光法均未检测到腺病毒的标本中,有3份为PCR阳性(包括1份7型,2份3型)。结论该方法鉴别3、7、11、21型腺病毒具有快速、简便、特异等特点,适用于腺病毒型别鉴定,可以为急性呼吸道感染的临床或群体公共卫生事件提供病原学诊断依据。

主 题 词：腺病毒 多重聚合酶链反应 分型 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 1010[医学-医学技术类] 100215[100215] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3760/j.issn:0254-6450.2007.08.014

馆 藏 号：203717084...