不结球白菜ISSR反应条件的优化

作     者：马金骏 冒维维 朱玉英 陈学好 陈锦秀 薄天岳 Ma Jinjun;Mao Weiwei;Zhu Yuying;Chen Xuehao;Chen Jinxiu;Bo Tianyue

作者机构：农业科学院园艺研究所上海市设施园艺技术重点实验室上海201106 扬州大学园艺与植物保护学院扬州225009 

基　　金：上海市科委重大科技攻关项目(06DZ19103) "十一五"国家科技支撑计划子课题(2006BAD01A7-2-06) 

出 版 物：《分子植物育种》 (Molecular Plant Breeding)

年 卷 期：2007年第5卷第F11期

页      码：207-212页

摘      要：本文通过单因素试验确定了Taq DNA聚合酶、dNTP、引物和Mg^(2+)4种因素在不结球白菜ISSR反应体系中的适宜浓度范围,并在此基础上利用正交试验设计,从4种因素3个水平对不结球白菜ISSR反应体系进行了优化,确立了适合不结球白菜的ISSR反应体系,并在10个不结球白菜品种中进行了验证。在20μL反应体系中,含Taq DNA聚合酶1U、dNTP 0.25 mmol/L、引物0.25μmol/L、1×PCR buffer、Mg^(2+) 2.5 mmol/L、模板DNA 30 ng。通过梯度PCR测验和总循环次数梯度处理试验,确定了适宜的退火温度和总循环数。这一体系的建立为今后利用ISSR技术进行不结球白菜种质资源分类、遗传图谱构建和基因定位奠定了技术基础。

主 题 词：不结球白菜 ISSR 单因素试验 梯度PCR 

学科分类：09[农学] 0902[农学-自然保护与环境生态类] 090202[090202] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1672-416X.2007.z1.034

馆 藏 号：203717274...