白血病人的gfi-1表达及慢病毒介导的gfi-1基因沉默对K562细胞增殖的影响

作     者：战榕 吴顺泉 黄豪博 黄胜林 林君 ZHAN Rong;WU Shun-Quan;HUANG Hao-Bo;HUANG Shen-Lin;LIN Jun

作者机构：福建医科大学协和医院血液科福建福州350001 上海市肿瘤研究所癌基因及相关基因国家重点实验室上海200030 

出 版 物：《中国实验血液学杂志》 (Journal of Experimental Hematology)

年 卷 期：2010年第18卷第4期

页      码：849-854页

摘      要：本研究旨在检测独立生长因子(Gfi-1)在白血病患者的表达水平并探讨慢病毒介导的gfi-1基因沉默对人白血病细胞株K562增殖的影响。采用荧光实时定量PCR及Westernblot方法检测初治白血病患者gfi-1的表达水平,分析其在各型白血病中的表达情况。设计、合成一对针对gfi-1 mRNA的shRNA序列,退火后连接到pLVTHM干扰载体上,与psPAX2、PDM2G共转HEK293T细胞,包装产生慢病毒颗粒并测定病毒滴度,感染K562细胞,建立稳定株。应用实时定量PCR和Western blot方法检测K562细胞gfi-1及baxmRNA和蛋白的表达,并与对照组进行比较.结果表明:慢病毒介导的shgfi-1能明显降低gfi-1的mRNA及蛋白水平,而bax的mRNA及蛋白水平则都上调。CCK-8检测发现,与对照组相比,shgfi-1能明显抑制K562细胞的增殖。结论:gfi-1在初治白血病患者中的高表达可能参与白血病的发生发展。gfi-1特异的shRNA干扰可以有效地下调K562细胞gfi-1基因的表达,抑制K562细胞的增殖,gfi-1基因可能是白血病基因治疗的一个有效靶点。

主 题 词：gfi-1 白血病 RNA干扰 K562 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

馆 藏 号：203718271...