小鼠cyclin A2正义和反义真核表达载体的构建及鉴定

作     者：秦文华 付春景 QIN Wenhua;FU Chunjing

作者机构：中国平煤神马医疗集团总医院病理科河南平顶山467000 郑州大学基础医学院病理生理学教研室河南郑州450001 

出 版 物：《中国现代医生》 (China Modern Doctor)

年 卷 期：2012年第50卷第31期

页      码：1-3,7页

摘      要：目的构建小鼠cyclin A2的正义和反义真核表达载体。方法采用小鼠胚胎组织取材,提取总RNA。设计引物,采用RT-PCR方法扩增小鼠cyclin A2 mRNA得到cyclin A2的DNA,将此DNA插入pGEM-T载体,转化入JM109感受态细菌。将鉴定得到的重组质粒进行扩增,EcoRⅠ酶切后,回收cyclin A2目的片段亚克隆入pcDNA3.1真核表达载体。酶切筛选鉴定重组的真核表达载体pcDNA3.1-cyclin A2。结果将小鼠基因的开放阅读框(ORF)重组到真核表达载体pcDNA3.1内,用EcoRⅠ酶切重组质粒后可得到一接近1660 bp的DNA条带,核酸测序证实和GenBank所公布序列相符。HindⅢ酶切鉴定重组质粒后,证明分别为正向和反向插入载体的质粒。DNA测序证明构建的真核表达载体pcDNA3.1-cyclin A2的序列是正确的。结论成功构建了小鼠cyclin A2的正义和反义真核表达载体。

主 题 词：细胞周期蛋白A2 正义 反义 真核表达载体 

学科分类：1001[医学-基础医学] 10[医学] 

馆 藏 号：203719367...